La coloration négative - Uranyless

Protocole de coloration négative

La coloration négative est une technique très utile en microscopie électronique, elle permet de caractériser la morphologie des particules isolées comme les bactéries, virus, protéines, nanoparticules, liposomes, exosomes, etc.

Protocole de coloration:
1- Sur un bout de Parafilm ou toute autre surface hydrophobe, déposer une goutte d’environ 10µl de votre solution et une goutte d’UranyLess.
2- A l’aide d’une pince fine, déposer sur la goutte de votre échantillon, une grille revêtue d’un film formvar-carbone. Laisser en contact environ 1mn.
3- Égoutter votre grille, à l’aide d’un papier filtre.
4- Contraster votre grille en mettant en contact durant 1 min sur la goutte d’UranyLess.
5- Égoutter, sécher durant 5 min puis observer au microscope.

colo neg

Mise au point de la technique:
– Parfois vous avez très peu d’échantillon sur votre grille, dans ce cas ioniser votre grille.
– Si vous avez au contraire trop d’échantillon, lavez sur une goutte à l’eau avant de contraster.
– La coloration est trop intense, dans ce cas laver 1 min à l’eau après le contraste à l’UranyLess.

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