Coloration Negative
Protocole de coloration négative
La coloration négative est une technique très utile en microscopie électronique, qui permet de caractériser la morphologie de particules isolées telles que des bactéries, des virus, des protéines, des nanoparticules, des liposomes, des exosomes, etc.
Protocole de coloration :
- Sur une feuille de Parafilm ou toute autre surface hydrophobe, déposez une goutte d’environ 10 µl de votre solution ainsi qu’une goutte d’UranyLess.
- À l’aide d’une pince fine, placez une grille recouverte d’un film de formvar-carbone sur la goutte de votre échantillon. Laissez en contact pendant environ 1 minute.
- Égouttez la grille à l’aide de papier filtre.
- Contrastez la grille en la mettant en contact avec la goutte d’UranyLess pendant 1 minute.
- Égouttez, laissez sécher pendant 5 minutes, puis observez au microscope.
Affiner la technique :
- Parfois, vous pouvez avoir très peu d’échantillon sur votre grille ; dans ce cas, ionisez votre grille.
- Si vous avez trop d’échantillon, rincez-le sur une goutte d’eau avant de le contraster.
- Si la coloration est trop intense, rincez pendant 1 minute dans de l’eau après avoir contrasté avec UranyLess.
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